兰州病原微生物试验标准 华微检测

病原微生物检测在感染判定中意义重大，越来越多的检测技术引入，除了传统的检测方法如涂片染色、培养分离、*学技术、核酸检测等，还有新兴的二代测序技术等。
病原微生物检测——血清*学方法：
*学技术是利用特抗原抗体反应，观察和研究组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。为了显示和观察这种抗原抗体反应，需要预先将某种标记物结合到抗体上，借标记物的荧光或酶的有色反应、放射性或高电子密度，在光镜或电镜下进行定性、定位或定量研究。各种形式的*分析方法如放射*分析(RIA)、酶*分析(EIA)、间接酶联*吸附(EL ISA)、荧光*分析(FIA)、生物发光*分析(BIA)、化学发光*分析(CIA)等，直接检测微生物或通过间接检测微生物的成份及微生物代谢产物(如)检出微生物。各大文献数据库提供的数据显示，几乎建立了所有病原体的血清学检测方法，表明该方法也成为了一种实验室常用的成熟的检测技术。

病原微生物检测——生物芯片：
生物芯片技术是将生物大分子，如寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、肽、抗原以及抗体等固定在诸如硅片、玻璃片、塑料片、凝胶和尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵，当待测样品中的生物分子与生物芯片的探针分子发生杂交或相互作用后，利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行检测和分析。根据生物芯片上探针的分子种类而将之分为DNA芯片(即基因芯片)和蛋白质芯片。微生物检测基因芯片是指用来检测样品中是否含有微生物目的核酸片段的芯片。基于高通量、微型化和平行分析的特点，微生物检测基因芯片在微生物病原体检测、种类鉴定、功能基因检测、基因分型、突变检测、基因组监测等研究领域中发挥着越来越重要的作用。

病原微生物检测——分子生物学与*学相结合的方法：
1、*PCR：
*PCR(immuno polymerase chain reaction，IM PCR)是1992年Sano等[16]建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。该技术把抗原抗体反应的高特和聚合酶链反应的高敏感性**结合起来，它的基本原理是用一段已知DNA分子标记抗体作为探针，用此探针与待测抗原反应，PCR扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA分子，电泳定性，根据特PCR产物的有无，来判断待测抗原是否存在。目前，国内外报道的*PCR的敏感性一般比现行的EL ISA法高102～105倍。由于PCR产物在抗原量未达到饱和前与抗原抗体复合物的量成正比，因此*PCR还可用于抗原的半定量试验。
2、PCR2EL ISA：
PCR2EL ISA法是PCR与EL ISA技术结合的检测方法。其综合了PCR，分子杂交，和EL ISA 3种技术的优点。主要用于检测样品中的特定基因。它引入(或生物素)标记的dN TP或引物进行PCR扩增，利用酶标抗抗体(或酶标记亲和素)进行EL ISA检测，代替了用于常规PCR产物检测的电泳方法，方便快捷，易于处理大量样品，且其灵敏度比使用琼脂糖凝胶电泳检测方法高100倍，当有适当的标准品时，还可进行定量测定。

病原微生物检测——传感器技术和分子诊断技术相结合：
生物传感器是将新兴的传感器技术和分子诊断技术相结合而成的一种新技术，是现代诊断发展的一个新方向。生物传感器包含两部分，即分子识别器件和换能器。在待测物、识别器件以及转换器件之间由一些生物、化学、生化作用或物理作用过程彼此联系。由于生物传感器检测准确、操作简便等特点，近年来已经在许多领域取得了很大的进展，在生物分子相互作用、药物筛选、诊断、食物检测等领域获得了广泛的应用。其中中用于病原体检测的以DNA生物传感器为常见。尽管生物传感器作为一种新的传感元件近年来得到了很大的发展，许多光化学、电化学以及压电晶体都相继在生物传感器中得到应用。与常规的核酸和蛋白质检测相比，具有检测准确、操作简单等特点，但由于它存在灵敏度不够、*受杂质干扰等缺点，随着研究的进一步深化和技术方法的改进，这些问题将会得到解决。
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